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          抗原修復(fù)鍋的使用方法

           更新時(shí)間:2018-09-25 點(diǎn)擊量:3927

          抗原修復(fù)鍋Antigen Retriever

              
          免疫組織化學(xué)方法成功與否關(guān)鍵在于抗原決定簇的保存和暴露.組織經(jīng)甲醛固定.甲醛的醛基與

          抗原蛋白的氨基交聯(lián),使決定簇的構(gòu)像改變.從而影響檢測蛋白表達(dá).要充分暴露抗原決定簇,通

          常用到抗原修復(fù)鍋。強(qiáng)適于甲醛固定的組織,經(jīng)石蠟包

          埋后進(jìn)行免疫染色前的處理,配合特別的抗原修復(fù)緩沖液確保你得到搞質(zhì)量的免疫染色效

          果。

          · 一次可以在6中不同緩沖液中運(yùn)行,進(jìn)行抗原暴露

          · 僅暴露抗原決定簇,不損傷組織的形態(tài)

          · 實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定,結(jié)果重現(xiàn)性高

          · 系列的玻片在獨(dú)立環(huán)境中經(jīng)過處理

          抗原修復(fù)鍋怎樣工作?

              看上去,抗原修復(fù)鍋似我們烹飪的高壓鍋。這是一款功能*的“高壓鍋,主要用于抗原暴露

          的工作,主要的工作原理也是裝玻片的幾個分室可以達(dá)到高溫(>120°C)高壓。靈敏的傳感控制

          器來保持一定的溫度和壓力及一定的時(shí)間,這些工作參數(shù)都是經(jīng)過嚴(yán)格的科學(xué)實(shí)驗(yàn)得到的數(shù)

          據(jù)。當(dāng)達(dá)到需要的溫度,抗原修復(fù)鍋會在該溫度下保持幾分鐘,之后鍋內(nèi)玻片被冷卻2個多小

          時(shí),特殊設(shè)材質(zhì)的內(nèi)鍋體控制了鍋和玻片的冷卻速度。 

          誰是受益人?

              研究病理的實(shí)驗(yàn)室,那里需要高質(zhì)量染色照片(用來發(fā)表)的

              缺乏技術(shù)人員的實(shí)驗(yàn)室,學(xué)生和博士后均可以處理玻片進(jìn)行組織染色,且不需要很多時(shí)間來摸索

              小型病理實(shí)驗(yàn)室,每天處理的玻片數(shù)量有限

          怎樣選擇一種緩沖液(Buffer

              如果你已經(jīng)知道哪種緩沖液用在微波的某種組織抗原修復(fù),那么用抗原修復(fù)鍋時(shí),這種緩沖

          液也同時(shí)適用的機(jī)會很大。我們提供四種即用型緩沖液R-Buffer A/B/C/U,同時(shí)也提供同種更加

          溫和的組織處理緩沖液,我們稱之G系列,R-Buffer AG/BG/CG/UG。

              
          選擇Buffer,主要考慮以下兩點(diǎn):


          1.  抗原的自然特性以及所選擇的抗體


          抗原自身特性和抗原的位置都是首要考慮。我們建議你剛開始的時(shí)候選擇抗原表達(dá)環(huán)境的

          適Buffer。以下是經(jīng)驗(yàn)供大家參考:

          Most of the nuclear antigens (apoptosis-related, survival-related, proliferation-r

          elated) R: Buffer A (or AG).

          Cell adhesion molecules, cell membrane antigens (extracellular domain) R: Buffer A (or AG)

          Cytoskeleton and cytoskeleton-associated molecules – R:Buffer A (or AG)

          Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer B (or BG)

          Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer C (or CG)

          Most of antibodies raised against a linear peptide – R: Buffer U (or UG)

          2.  固定液以及固定程度

          建議的組織切片的抗原修復(fù)處理是一種針對普通的適化狀態(tài)切片。如果用來切片的組織塊沒有

          充分固定,或者過固定(留在福爾馬林溶液中時(shí)間過長),或者用了其它的固定液,那么,處

          理組織切片的流程方案需要重新修訂,便利的辦法是選擇使用G系列緩沖液。對于過固定的

          材料一般推薦用U buffer,或者在同一Buffer里面增加循環(huán)

           

          抗原修復(fù)鍋技術(shù)參數(shù):

          Heigh

          335 mm

          Capacity

          9 litres

          Max. Instrument length

          228 mm

          Width.

          340 mm

          Net Weight

          4.5 kilos

          Internal chamber Dimensions (d/h)

          210/230 mm

          Max. Load Weight

          3.0kg

          Max. Single Fault Temperature

          133.3°C


          使用抗原修復(fù)鍋進(jìn)行染色的效果示例


          1.福爾馬林固定,石蠟包埋,人乙狀結(jié)腸組織切片,經(jīng)抗原修復(fù)鍋進(jìn)行抗原暴露,R-

          Buffer C (pH 6.0),組織玻片降溫過夜,抗體MIB-1,抗原Ki-67,R-Detect HRP系統(tǒng)染色

           

          2. .福爾馬林固定,石蠟包埋,人乙狀結(jié)腸組織切片,經(jīng)抗原修復(fù)鍋進(jìn)行抗原暴露,R-

          Buffer A (pH 8.1),組織玻片降溫過夜,抗體#4B11,抗原CD8 (cell membrane),R-

          Detect HRP系統(tǒng)染色.

          儀器及配件的選購:

          貨號

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          62700-20

          Retriever 220 volt (內(nèi)含3chamber

          1

          62705-01

          Slide Chamber

          3/pk

          62705-02

          Chamber Rack

          1

          62705-03

          Lifting Device

          1

          62705-05

          Cord Set (Europe)

          1

          緩沖液的選購:

          貨號

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          62706-10

          R-Buffer A (10x)

          250 ml

          62706-11

          R-Buffer B (10x)

          250 ml

          62706-12

          R-Buffer C (10x)

          250 ml

          62706-13

          R-Buffer U (10x)

          250 ml

          62707-10

          R-Buffer AG (2x)

          250 ml

          62707-11

          R-Buffer BG (2x)

          250 ml

          62707-12

          R-Buffer CG (2x)

          250 ml

          62707-13

          R-Buffer UG (2x)

          250 ml

           

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